Laboratoria hodowli komórkowej mają zapobiegać skażeniu mikrobiologicznemu i szkodliwym skutkom, wymagając, aby laboratoryjne środowiska pracy były czyste, świeże powietrze, suche i bezdymne. Dlatego laboratorium kultury komórkowej powinno zwrócić szczególną uwagę na proces planowania i projektowania.
Po pierwsze, projekt laboratorium
1. Hodowla komórkowa jest techniką aseptyczną, która wymaga, aby środowisko pracy i warunki były wolne od zanieczyszczeń mikrobiologicznych i innych szkodliwych czynników.
2, pokój hodowli komórkowej i zasady projektowania mają zapobiegać skażeniu mikrobiologicznemu i szkodliwym czynnikom, wymagającym czystego środowiska pracy, świeżego powietrza, suchego i bezdymnego pyłu.
3. Zasada projektowania pomieszczenia do hodowli komórek jest ogólnie taka, że aseptyczny obszar działania znajduje się wewnątrz pomieszczenia, w którym pomieszczenie jest mniej ruchliwe, a konwencjonalna operacja i kultura zamknięta znajdują się w jednym pomieszczeniu, które jest czystym pomieszczeniem o powierzchni 100 000 -poziom czyste środowisko. Prace szorujące i dezynfekujące znajdują się poza pomieszczeniem czystym, aby uniknąć zanieczyszczenia środowiska wewnętrznego. Pomieszczenie do czyszczenia komór wymaga systemu klimatyzacji i utrzymuje pewne dodatnie ciśnienie na zewnątrz.
4, laboratorium anatomii służy głównie do oddzielania tkanek narządów, musi mieć stół aseptyczny, mikroskop rozdzielający, różne urządzenia chirurgiczne.
Po drugie, sprzęt laboratoryjny
1, ultra-czysta szafka robocza / szafka bezpieczeństwa biologicznego
Hodowla komórkowa musi być w sterylnym środowisku. Podczas przeprowadzania eksperymentów na komórkach, musi być przeprowadzony w powietrzu na poziomie 100. Następnie musimy kupić czystą szafkę lub biobezpieczeństwo, które może zapewnić 100 poziomów czystości.
Dla większości laboratoriów ultra-czysty stół warsztatowy jest w pełni zdolny do zaspokojenia potrzeb operacyjnych laboratorium. Jeśli chodzi o rozmiar ultra-czystej platformy, zależy to od wielkości laboratorium i liczby osób, które decydują, czy jest to jedno czy podwójne, czy kupić jednostronne czy dwustronne, i kupić kilka . Jeśli operacja eksperymentalna jest biologicznie niebezpieczna, powinieneś wybrać bardziej zaawansowaną biobezpieczną szafkę niż ultra czysta ławka.
2, inkubator dwutlenku węgla
Inkubatory dwutlenku węgla są szeroko stosowane w większości komór hodowli komórkowej. Zaletą inkubatora z dwutlenkiem węgla jest to, że może zapewnić pewną ilość CO2 (zwykle 5%) wymaganą do hodowli komórkowej i łatwo jest ustabilizować pH roztworu hodowlanego i nadaje się do hodowli otwartej lub półotwartej .
3, mikroskop
Odwrócone mikroskopy są niezbędnym wyposażeniem w codziennej pracy laboratoriów hodowli komórkowej. Są one używane głównie do zrozumienia wzrostu komórek i obserwowania obecności lub braku zanieczyszczeń. Jeśli pozwalają na to fundusze, zaleca się użycie wysokiej jakości mikroskopu z kontrastem fazowym, mikroskopu sekcyjnego, mikroskopu fluorescencyjnego, systemu wideo lub urządzenia do filmowania poklatkowego wyposażonego w system kamer do rejestrowania i rejestrowania wzrostu komórek w dowolnym momencie.
4, maszyna czystej wody / maszyna ultra czystej wody
Hodowla komórkowa wymaga również ultraczystego systemu wodnego. Zwykła czysta woda i woda destylowana nie mogą być używane do hodowli komórek, podczas gdy ultraczysta woda jest używana głównie do konfiguracji niektórych nośników i odczynników. Woda ultraczystej wody może być wodą z kranu lub czystą wtórną. Woda (dobrej jakości woda dejonizowana, odporność na około 10 megaomów), oprócz ultra-czystej wody hodowli komórkowej, najważniejsza endotoksyna ma surowe wymagania, więc wybierając maszynę do ultra czystej wody, konieczne jest wybranie elementów ultrafiltrów . Model.
5, wirówka
Hodowla komórkowa wymaga wirowania w celu zebrania komórek pasażujących. Ogólna prędkość obrotowa wynosi od 1000 do 1500 obrotów na minutę, więc konieczne jest zakupienie wirówki o niskiej prędkości normalnej temperatury, a także przyniesienie 10 ml, 50 ml i wirnika płytki hodowlanej. Do zbierania osadów komórkowych lub supernatantów komórkowych wymagana jest również szybka wirówka chłodzona.
6, zbiornik ciekłego azotu
W celu utworzenia banku komórek konieczny jest zbiornik ciekłego azotu. Zamrożone komórki w zbiorniku z ciekłym azotem mogą ogólnie zapewnić aktywność biologiczną w ciągu ostatnich dziesięciu lat. Jeśli chodzi o wielkość zbiornika z ciekłym azotem, w zależności od wielkości banku komórek. I nastaw.
7, lodówka o niskiej temperaturze
Komórki należy przechowywać w temperaturze od -70 do -80 stopni przez noc w celu kriokonserwacji, a następnie umieścić w zbiorniku z ciekłym azotem, który wymaga zamrażarki niskotemperaturowej.
8, okno transferu
Dom, w którym jest zbudowany, powinien być odizolowany od świata zewnętrznego. Wymaga to zakupu okna transferowego, aby dostarczyć przedmiot, zmniejszając ryzyko zanieczyszczenia, a wszystkie przedmioty wchodzące do pomieszczenia są sterylizowane promieniami UV w oknie transferu, aby zapewnić bezpieczeństwo czystego pomieszczenia.
9, autoklaw
Wszystkie rodzaje naczyń laboratoryjnych należy sterylizować przed i po użyciu. Warunki sterylizacji wynoszą na ogół 121 ° C przez 20 do 30 minut. Wymaga to umieszczenia autoklawu w czystym pomieszczeniu, aby zapewnić bezpieczeństwo biologiczne.
10, pistolet do pipetowania, pistolet do pipetowania elektrycznego
W eksperymencie z komórkami wymagane są różne końcówki i pipety, więc konieczne jest skonfigurowanie pipety.
11, wszelkiego rodzaju materiały eksploatacyjne potrzebne w hodowli komórkowej
Różne płytki do hodowli komórkowych, kolby do hodowli komórkowych, pipety do płytek itp.
12, reszta instrumentu
W przypadku eksperymentów z komórkami oscylatory i mieszadła magnetyczne mogą być również wymagane do mieszania cieczy; niektóre nie nadające się do czyszczenia pojemniki ze stali nierdzewnej lub szkła wypełnione komórkami wymagają pomocy ultradźwięków; w przypadku eksperymentów immunologicznych konieczny jest lód. Jeśli zapotrzebowanie na kąpiel i kruszony lód jest duże, musisz kupić maszynę do lodu. Ponadto uszkodzone komórki mogą wymagać ultradźwiękowego urządzenia do rozbijania komórek. Wreszcie, jeśli komórka jest duża, należy zapewnić wózek. Ciekłe media to zawsze dręcząca rzecz.