Szafa bezpieczeństwa biologicznego klasy III zapewnia absolutne gwarancje bezpieczeństwa, których nie zapewniają szafy bezpieczeństwa klasy I i klasy II. Wszystkie biologiczne szafy bezpieczeństwa klasy 3 są w pełni obudowane. Eksperyment przeprowadzono całkowicie przez przednie rękawice okienne. Podczas codziennej pracy wnętrze szafki zawsze będzie utrzymywać podciśnienie. Nawet w przypadku awarii systemu zapobiegania zanieczyszczeniom fizycznym może.
Wszystkie biologiczne szafy bezpieczeństwa klasy 3 są chronione przez czyste powietrze filtrowane przez filtr HEPA i zapobiegają zanieczyszczeniu krzyżowemu próbki. Spaliny są zwykle filtrowane przez HEPA. Lub użyj dwóch filtrów HEPA obok siebie. Elementy wymagane do eksperymentu zostały dostarczone do szafy wraz z kanałem izolacyjnym umieszczonym z boku szafki. Szafy bezpieczeństwa poziomu 3 zwykle kierują spaliny do laboratorium. Jednak powietrze może być również odprowadzane bezpośrednio do środowiska zewnętrznego przez zewnętrzną rurę wydechową. W przypadku stosowania układu rur wydechowych trzypoziomowa szafka bezpieczeństwa nadaje się również do operacji mikrobiologicznych wymagających dodania toksycznych chemikaliów podczas badania. Wszystkie biologiczne szafy bezpieczeństwa klasy 3 mogą być używane w doświadczeniach z czynnikami mikrobiologicznymi, obejmującymi poziomy bezpieczeństwa biologicznego na poziomie jeden, dwa, trzy i cztery.